禽流感病毒(AIV)属于正粘病毒科、流感病毒属、A型流感病毒。AIV囊膜表面有 2 种糖蛋白纤突，分别是血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。按照两种纤突的抗原性不同，AIV分为16个HA亚型(H1~H16)和9个NA亚型(N1~N9)。依据不同AIV毒株对鸡致病性的强弱，可以将AIV分为高致病性禽流感(HPAIV)、低致病性禽流感(LPAIV)和非致病性禽流感(NPAIV)。 H9亚型禽流感病毒(AIV H9)为LPAIV，AIVH9感染后不会出现群体大批死亡，然而感染率一直高居不下，并会导致产蛋率大幅度下降、肉鸡的生长发育迟缓等，因此，给养禽业带来巨大的经济损失。

 目前检测AIVH9的主要方法有病毒分离鉴定、血凝-血凝抑制试验(HA-HI试验)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR等。但这些方法各有不足之处，如病毒分离鉴定及HA-HI试验所耗时较长，不适应临床快速诊断的要求,RT-PCR技术复杂且电泳时需要接触EB等有害物质，实时荧光定量PCR所需仪器和试剂昂贵，这些不足阻碍了它们的在临床诊断上的应用。近年来，一项新的生物传感器技术已经成功应用于环境成份分析、食品工业质检测和临床医学诊断等领域。生物传感器技术具有操作简便快速和反应灵敏特异等优点。

 本发明针对上述技术问题，发明一种夹心免疫试剂盒及其应用，采用甲壳胺修饰石墨烯，制成石墨烯-甲壳胺复合物(G-Chi)和石墨烯-甲壳胺-Au/Pt复合物(G-Chi-Au/Pt)，从而建立一种简便、快速、灵敏的电化学免疫的试剂盒，用以检测AIVH9。电化学免疫传感器是将免疫检测技术与电化学传感技术相结合，构建而成的一种新型生物传感器。它同时具备了免疫测定法的高特异性和电化学传感技术的高敏感性，可用于痕量病毒的分析检测。本发明首次提出以G-Chi作为传感器平台，以G-Chi-Au/Pt作为传感器的信号放大材料，为AIVH9检测提供了一种特异、敏感和快速的新型检测诊断方法，对AIV H9有效防控具有重要意义。