万丽军1曾婷婷1王粲1覃俊江2牙侯勋1任红玉1王盛1陈作鑫1罗思思1李孟1谢芝勋1严明1谢丽基1
1.广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国广西-东盟跨境动物疫病防控重点实验室
2.广西富凤农牧集团有限公司
发表刊物：中国兽医学报 . 2026 ,46 (02) : 283-289
摘要：为了建立禽呼肠孤病毒(ARV)和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)二重微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法，本试验根据ARV S1133毒株S1基因序列和FAdV-4 GX2019-010的hexon基因序列保守区设计特异性引物和探针。通过筛选引物和优化反应条件后，建立了二重ddPCR定量检测ARV和FAdV-4的方法，并对建立方法的灵敏度、重复性和特异性进行了测试。结果显示：在引物与探针浓度为2∶1的情况下，筛选得到ARV-JC-F1/ARV-JC-R1、FAdV-4-JC-F1/FAdV-4-JC-R1的反应更好；最佳退火温度为59℃;最低能检测到的ARV和FAdV-4标准品质粒DNA浓度分别为32.67、5.27拷贝/μL;对连续稀释的ARV和FAdV-4标准品质粒DNA检测结果的变异系数均小于15%,同时检测其他多种禽类病毒，均为阴性；以建立的ARV和FAdV-4二重ddPCR和实时荧光PCR同时检测10份临床样品，结果显示一致。结果表明，本研究建立的二重ddPCR方法可定量检测ARV及FAdV-4,具有灵敏度高、重复性好、特异性强等特点，为绝对定量检测ARV及FAdV-4提供......
关键词： 禽呼肠孤病毒;血清4型禽腺病毒;微滴式数字PCR;绝对定量;
基金资助： 广西科技重大专项资助项目(桂科AA23062050)； 国家现代农业产业技术体系广西家禽产业创新团队专项资金资助项目(nycytxgxcxtd-2024-19)； 广西自然科学基金资助项目(2025GXNSFBA069040,2024GXNSFAA010054)； 国家自然科学基金资助项目(32300148)；
DOI： 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.02.07
专辑： 农业科技;基础科学
专题： 生物学;畜牧与动物医学
分类号： S852.65