羊支原体肺炎又称羊传染性胸膜肺炎,主要由绵羊肺炎支原体(MO)、丝状支原体山羊亚种(MMC)、山羊支原体山羊肺炎亚种(MCC)和山羊支原体山羊亚种(MCSC)等多种支原体引发的绵羊或山羊的一种传染病。我国多个省区均有支原体肺炎的报道,给养羊业造成了巨大的经济损失。目前对绵羊肺炎支原体抗体检测与防治工作力度薄弱,远远落后于实际需要,亟待找到一种适宜在羊场等基层推广应用的检测技术。广西羊支原体流行株主要为M0、MMC。羊支原体肺炎的病原分离培养工作繁琐、困难,耗时久,间接血凝检测方法交叉反应严重,重复性差,PCR等分子生物学诊断方法成本高,不宜推广到基层,但是ELISA方法操作简便、交叉反应少、重复性好,各地大多已配备相关设备。羊群未免疫相关疫苗情况下,若感染支原体产生抗体,即可通过ELISA方法检出,因此建立特异性强、灵敏度高的ELISA方法无疑是目前最适合基层技术人员使用的快速诊断绵羊肺炎支原体的方法。发明旨在建立一种能适合羊场等基层使用的,快速检测羊肺炎支原体抗体的间接ELISA方法,推广先进的羊肺炎支原体抗体检测技术,保障绿色养羊产业发展和食品安全等方面具有重要意义。
本发明公开了一种快速检测绵羊肺炎支原体抗体的ELISA试剂盒,包括包被酶标板、阴性标准血清、阳性标准血清、酶标二抗、洗涤液、稀释液、底物液和终止液。通过构建表达载体获得免疫原性较强的重组绵羊肺炎支原体外膜蛋白MOL,以此作为包被抗原,建立了特异性强、灵敏度高的绵羊肺炎支原体抗体ELISA检测方法和试剂盒,将该试剂盒用于羊血清临床样品检测,将有助于深入开展绵羊肺炎支原体病的免疫预防和免疫价值研究,为快捷检测绵羊肺炎支原体抗体提供必要的技术手段。